mRNA,中文译名“信使核糖核酸”,是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息、能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸;mRNA分子量大、亲水性强,但自身的单链结构极不稳定,易被降解。mRNA的有限寿命使细胞能够快速改变蛋白质合成以响应其不断变化的需求,却难以满足成药性的要求。加上mRNA分子本身携带负电荷,难以穿过表面同为负电荷的细胞膜,所以需要特殊的修饰或包裹递送系统才能实现mRNA药物的胞内表达,因此,递送技术是mRNA药物成功与否的关健。脂质纳米粒(Lipid Nanoparticle,LNP)是目前主流的载体递送方式。由于其比较容易被抗原呈递细胞吸收,因此常应用于疫苗。LNP组分主要包括以下四大类:阳离子脂质、胆固醇、聚乙二醇脂质及辅助型脂质;每个组分的作用和功能如下:
(1)阳离子脂质体是LNP递送系统的关键成分。目前各mRNA公司使用的阳离子类脂质分子的具体结构各不相同,但都属于特定条件下带正电荷的阳离子脂质。可电离阳离子脂质是LNP系统实现递送功能的关键,由于mRNA本身具有负电性,通过正负电性吸引,mRNA被结合在LNP内部,可以提高mRNA在体内的稳定性,并逃离溶酶体的降解。LNP被细胞吸收后,核内体的低pH环境将与LNP融合,并释放mRNA进入胞质胶体。
(2)胆固醇的主要作用为介导LNP内吞,并有利于确保LNP的双层结构及脂质的流动性。辅助型中性脂质(如各种磷脂)也是用于构建LNP双层结构的,因为阳离子脂质体的双层结构并不稳定。
(3)聚乙二醇修饰的脂质体,可在纳米粒合成过程中控制纳米粒的粒径大小。由于聚乙二醇乙氧基链节的强水合作用,聚乙二醇结构在水相中可形成亲水保护层,能够有效防止纳米颗粒在储存过程中聚集,从而维持LNP的空间稳定性;同时聚乙二醇在LNP颗粒表面可保护颗粒不被体内的免疫蛋白检测,屏蔽血浆蛋白等成分结合颗粒,避免LNP颗粒在体内被清除。
(4)辅助型脂质的代表为DOPE,DSPC及DOPC等磷脂类脂质。在制备阳离子脂质体过程中,辅助型脂质具有非常强的协同作用,主要包括稳定双层膜和降低阳性成分毒性,在LNP被内吞时促进mRNA的释放并辅助阳离子脂质体的细胞渗透,以及确定mRNA-LNP复合物的形态,使复合物具有良好的可融性,提高跨膜效率。
尔生研发的mRNA递送系统,采用二条研发路径;一条是和LNP类似的递送系统,但在组分的比例和纳米粒径的大小方面,和现有的LNP系统有显著的差异;另一条路径是采用和LNP完全不同的组分来构建递送系统;公司对此已申请了相应的专利。